Ефект на рекомбинантен ФСХ (Gonal-F и Puregon) върху синтеза и секрецията на Естрадиол-17 бета от човешки гранулозни клетки ин-витро

[:bg]

Брой: 3/2005

Автор: Пламен Тодоров, Росица Конакчиева, Йосиф Димитров* Институт по Биология и Имунология на Размножаването – Българска Академия на Науките; АГ Център Й. Димитров, София*

Абстракт: 

 За предизвикване на хиперстимулация в асистираната репродукция се използват уринарни и рекомбинантни гонадотропни хормони, като относителният дял на вторите постоянно нараства поради редица преимущества. В настоящото изследване сравнихме непосредственото въздействие на два използвани в практиката препарата рекомбинантен човешки ФСХ -Conal-F (Serono) и Puregon (Organon) върху функционалната активност на човешки гранулозни клетки „ин-витро". Чисти култури бяха изолирани от аспирати, получавани от жени, участващи в програмите за „ин витро" оплождане. Произволно избрани култури бяха инкубирани с човешки рекомбинантен ФСХ съответно Conal-F или Puregon/ в присъствие или отсъствие на тестостерон. Съдържанието на ест-радиол-17 бета в средата беше изследвано чрез директен радиоимунологичен анализ. Самостоятелното добавяне на Conal-F и Puregon към клетъчните култури предизвика повишение в естрогеновата синтеза, като достоверно по-високо (р < 0,05) базално ниво в сравнение с клет­ките култивирани само в хранителна среда (3,5 с 1,2 пг/мл) се установи в супернатантите от културите инкубирани с Conal-F (9,8 ± 1,9 пг/мл). В присъствие на тестостерон и при двата гонадотропни препарата се постигна достоверна стимулация на естрадиоловата секреция от гранулозните клетки спрямо контролните култури (8,5 ± 3,1 пг/мл; р < 0,05 за Puregon и 18,9 ± 7,2 пг/мл; р<0,01 за Conal-F), като процентно спрямо базалните стойности измерени в контролите ефектът от стимулацията беше приблизително еднакъв за двата гонадотропина (221 % за Puregon и 192 % за Conal-F). Нашите изследвания показват повишена базална секреция на естрогени от гранулозни клетки в присъствие на Conal-F и сходен секреционен отговор на два­та изследвани гонадотропни препарата. Данни­те свидетелстват за близката им биологична ак­тивност, която е в основата на техния благоприятен клиничен ефект.

Ключови думи: човешки гранулозни клет­ки, естрадиол-17 бета, Conal-F, Puregon

Изтеглете целия брой 3/2005

[:en]

Issue: 3/2005

Author: Plamen Todorov, Rossitza Konakchieva, Yosif Dimitrov* Institute of Biology and Immunology of Reproduction – Bulgarian Academy of Sciences *Centerfor Human Reproduction, Sofia

Abstract: 

Recent clinical protocols for assisted repro­duction include ovarian hyperstimulation by means of urinary or recombinant gonadotropic hormones, by the predominant use of the latter for several important reasons. In the present study we compared the direct in-vitro effect on the functional activity of human granulosa cells of two recombinant preparations of human FSH – Conal-F and Puregon. Pure cultures were isolated from follicular aspirates received from women involved in IVF programmes. Randomly selected cultures were incubated with recombinant FSH (Conal-F or Puregon) in the abscence or presence of testos­terone. Estardiol-17 beta concentration was mea­sured in the supernatants by direct radioimmunoas­say. The separate incubation of the cultures with Conal-F or Puregon caused increase in the estrogen synthesis which was statistically significant (р < 0,05) compared to cells grown only in medium (3,5 ± 1,2 pg/ml) only with Conal-F (9,8 ± 1,9 pg/ml). Following combined treatment of Conal-F or Puregon with testosterone there was a significant enhancement of estradiol-17 beta release for both gonadotropins compared to controls (8,5 ± 3,1 pg/ml; p<0,05 for Puregon and 18,9 ± 7,2 pg/ml; p<0,01 for Conal-F). Percent stimulation over the basal secretion was 221 % in the case of Puregon and 192 % in the case of Conal-F respectively. In conclusion, our data demonstrated enhanced basal estrogen release of granulosa cells when incubated with Conal-F and similar secretory response to both gonadotropins in the presence of androgen precur­sor. The results are in accordance with other find­ings of close biological activity of the recombinant preparations used, which underlies their beneficial clinical effect.

Keywords: human granulosa cells, estradiol-17 beta, Conal-F, Puregon

Download the full issue 3/2005

[:]